Подготовка спермы для искусственной инсеминации

Причин ненаступления беременности, к сожалению, существует немало. При выявлении у пары шеечного фактора бесплодия, при котором забеременеть не получается из-за невозможности попадания достаточного количества сперматозоидов через шейку в полость матки, а также некоторых видов несильно выраженного мужского фактора, эффективным решением служит искусственная инсеминация.

При внутриматочной инсеминации, когда сперма вводится через катетер прямо в полость матки, недопустимо использование нативной (неочищенной) спермы. Обработка спермы для ВМИ обязательна. Это объясняется несколькими причинами. Во-первых, в необработаной сперме содержатся белки, чужеродные организму женщины и способные вызвать серьезную аллергическую реакцию и даже анафилактический шок. Во-вторых, сперма может быть инфицирована микроорганизмами, способными вызвать воспаление при попадании в матку.

При естественном оплодотворении роль фильтра выполняет цервикальный канал шейки матки, при прохождении через который сперма очищается от нежелательных компонентов. При искусственной инсеминации эту роль берет на себя эмбриологическая или андрологическая лаборатория клиники, в которой проводится эта процедура.

Подготовка спермы к инсеминации занимает около 2-х часов и включает в себя следующие этапы:

1. - забор эякулята путем мастурбации или разморозка (если сперма была предварительно криоконсервирована);
2. - проведение анализа спермы для оценки ее качества;
3. - разжижение спермы, которое проводится путем ее инкубации при 37°С в течение 30 минут;
4. - сама процедура очистки;
5. - разведение полученного концентрата из функционально здоровых сперматозоидов питательной средой.
6.  

Перед эмбриологом стоит задача очистить сперму от следующих компонентов:

- Семенная жидкость - жидкая часть эякулята, содержащая антигенные протеины, которые могут вызвать аллергическую реакцию, и простагландины, которые могут спровоццировать болезненные сокращения матки при попадании в ее полость.

- Посторонние клетки - иммунные и эпителиальные клетки, лейкоциты, незрелые герминативные клетки, а также клеточные элементы.

- Неактивные, поврежденные, мертвые и погибающие сперматозоиды. Разлагающиеся остатки таких спермиев выделяют реактивный кислород, при большой концентрации отрицательно влияющий на выживаемость и функциональность сперматозоидов. Очищение спермы от них облегчает перемещение жизнеспособных сперматозоидов при инсеминации, повышает их способность связываться с мебраной яйцеклетки и проникать через нее.

- Сперматозоиды с дефектами морфологии хотя иногда и способны оплодотворить яйцеклетку, но дальнейшее развитие таких эмбрионов может остановиться или нарушиться.

- Инфекционные агенты - бактерии и вирусы. Сами бактерии, прикрепляясь к поверхности сперматозоидов, снижают их подвижность и оплодотворяющую способность. Кроме того, выделяемые такими микроорганизмами эндотоксины снижают выживаемость спермиев. При попадании в женские половые пути бактерии и вирусы способны вызвать воспаление.

Кроме очистки спермы от примесей необходимо добиться наибольшей концентрации в питательной среде живых подвижных сперматозоидов без патологий - тех, с помощью которых оплодотворения наиболее вероятно. При этом подготовка должна быть проведена с минимальным повреждением мужских половых клеток. При выборе техники подготовки спермы применяют индивидуальный подход в зависимости от ее исходных качеств.

На сегодняшний день существует несколько методов обработки спермы для внутриматочной инсеминации. У каждой из них есть как преимущества, так и недостатки.

1. Метод флотации (всплывания, swim-up)
2. Этот метод основан на том, что подвижные сперматозоиды самостоятельно перемещаются вверх в промывающей среде, которая наносится на образец спермы. Во время инкубации такого образца активные сперматозоиды всплывают из эякулята в промывающую среду, которая затем аккуратно собирается для использования при инсеминации.
3. Метод относительно прост и нетребователен к лабораторному оборудованию и персоналу.
4. Недостатком такой техники является то, что с ее помощью не отсеиваются сперматозоиды с плохой морфологией, бактерии и вирусы.
5. Затраты времени на процедуру - 1-1,5 часа.
6.  

1. Метод промывания спермы
2. Это традиционный и несложный метод обработки спермы для удаления жидкой ее части. При использовании этого метода сперму смешивают с промывающей средой и центрифугируют. При этом сперматозоиды опускаются к дну пробирки, образуя осадок, который вновь промывается по той же схеме несколько раз.
3. Затраты времени на процедуру - менее часа.
4.  

1. Метод центрифугирования в градиенте плотности
2. Этот метод позволяет отделить жизнеспособные сперматозоиды от всех других компонентов спермы. При использовании этого метода в пробирку, в которой будет проходить очистка спермы, одна на другую аккуратно наслаивают специальные коллоидные жидкости с различной концентрацией. Сверху помещают разведенную сперму. Пробирку с таким "слоеным пирогом" центрифугируют. При этом наиболее подвижные сперматозоиды, осаждаясь на дно пробирки и, проходя через слои коллоидного раствора, очищаются от семенной плазмы, мертвых сперматозоидов, посторонних клеток и бактерий. Остаток жидкости осторожно убирается из пробирки, после чего осадок переносится в другую пробирку и промывается для удаления остатков использованного раствора.
3. Затраты времени на процедуру - от 20 минут до 1 часа.
4.  

1. Метод фильтрации
2. Этот метод используется после предварительного промывания спермы в промывающей среде путем центрифугирования. Осадок, полученный после такого промывания, фильтруется через стекловолокно под действием гравитации. Собранный фильтрат используют для внутриматочной инсеминации.
3. Затраты времени на процедуру - около 10 минут.
4.  

Специалист, занимающийся подготовкой спермы к инсеминации, выбирает среди доступных ему методов тот, который сможет обеспечить оптимальный результат для конкретного образца спермы. Эти же методики используются для подготовки спермы в программах ЭКО.

1. Пробная обработка эякулята
2. Если по результатам спермограммы у врача-репродуктолога возникают сомнения, к какой репродуктивной технологии прибегнуть - ВМИ, ЭКО или ИКСИ, возможно проведение пробной обработки спермы.
3.  

Так как положительный результат проведения внутриматочной инсеминации, как и любой другой процедуры ВРТ, в большой степени зависит от этапа подготовки спермы, репродуктивные клиники уделяют огромное внимание эффективности своих лабораторий и профессионализму занимающихся такой подготовкой сотрудников.